低温诱导植物细胞染色体数目的变化
低温能抑制纺锤体的形成,使染色体数目加倍,这是人教版教材中的经典探究实验。实验常用洋葱或大蒜的根尖为材料,经低温诱导、固定、解离、漂洗、染色和制片后,在显微镜下观察染色体数目变化。
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实验目的
学会用低温诱导染色体数目加倍,并制片观察。
实验原理
低温抑制有丝分裂前期纺锤体的形成,着丝粒分裂后,染色体不能被拉向细胞两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,于是细胞中的染色体数目加倍。
实验器材
- 洋葱(或大蒜)
- 冰箱冷藏室
- 卡诺氏液
- 体积分数95%酒精
- 解离液(15%盐酸与95%酒精1:1)
- 清水
- 改良苯酚品红染液
- 显微镜、载玻片、盖玻片
实验步骤
- 洋葱生根至约1cm,放入4℃冰箱诱导培养36 h
- 剪取根尖约0.5~1cm,放入卡诺氏液固定0.5~1 h
- 用95%酒精冲洗2次,再用解离液解离
- 用清水漂洗,再用改良苯酚品红染液染色
- 盖上盖玻片,压片,制成装片
- 先低倍镜找分生区,再高倍镜观察染色体数目
实验现象与结论
视野中大多数细胞处于分裂间期,可见少数处于分裂期的细胞。其中有正常的二倍体细胞,也有染色体数目加倍的细胞。结论:低温可以诱导植物细胞染色体数目加倍。
注意事项
- 盐酸、卡诺氏液有腐蚀性,须戴手套和护目镜
- 苯酚品红染液避免接触皮肤和衣物
- 酒精远离火源
常见问题
- 卡诺氏液的作用是什么?
- 固定细胞形态,使染色体保持在诱导后的状态。
- 为什么多数细胞看不到染色体加倍?
- 多数细胞处于间期,且不是所有分裂中的细胞都受到低温影响。
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