绿叶中色素的提取和分离

实验目的

学会提取和分离绿叶中的光合色素，说出色素的种类和颜色。

实验原理

绿叶中的色素能溶解在无水乙醇等有机溶剂中，因此可用无水乙醇提取。不同色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，因而可以分离。加入二氧化硅有助于研磨充分，加入碳酸钙可防止研磨时色素被破坏。

实验器材

• 新鲜菠菜叶
• 无水乙醇
• 层析液
• 二氧化硅
• 碳酸钙
• 研钵和研杵
• 漏斗和单层尼龙布
• 试管
• 滤纸条
• 毛细吸管
• 烧杯或大试管

实验步骤

1. 称取约5 g剪碎的菠菜叶放入研钵，加少许二氧化硅和碳酸钙。
2. 加入约10 mL无水乙醇，迅速研磨，用单层尼龙布过滤到试管，塞紧管口。
3. 将滤纸条一端剪去两角，距这一端1 cm处用铅笔画一条细线。
4. 用毛细吸管沿铅笔线画一条细而直的滤液细线，干后重复画1至2次。
5. 将滤纸条画线一端朝下插入层析液，滤液细线不能触及层析液，盖好容器。
6. 待色素带分开后取出滤纸条，观察并记录色素带的颜色和宽窄。

实验现象与结论

滤纸条上出现四条色素带，自上而下依次为：胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色），其中叶绿素a的色素带最宽。结论：绿叶中含有四种光合色素，在层析液中溶解度最高的是胡萝卜素。

注意事项

• 层析液有毒且易挥发，要在通风处操作并盖好容器
• 无水乙醇易燃，远离明火
• 实验后洗手，按要求处理废液

常见问题

为什么要加入碳酸钙？

碳酸钙可以中和研磨时细胞液泡中释放的酸性物质，防止叶绿素被破坏。

滤液细线为什么不能触及层析液？

否则色素会直接溶解到层析液中，滤纸条上就得不到清晰的色素带。