噬菌体侵染细菌的实验

实验目的

通过同位素标记，探究T2噬菌体的DNA和蛋白质哪一种是遗传物质。

实验原理

T2噬菌体由蛋白质外壳和DNA组成，S只存在于蛋白质中，P主要存在于DNA中。用35S、32P分别标记后侵染大肠杆菌，只有DNA进入细菌，蛋白质外壳留在细菌外。搅拌离心后，较轻的噬菌体外壳在上清液，较重的被侵染细菌在沉淀物中。子代噬菌体的性状由进入细菌的物质决定。

实验器材

• T2噬菌体
• 大肠杆菌
• 含35S的培养基
• 含32P的培养基
• 普通培养基
• 搅拌器
• 离心机
• 放射性检测仪器

实验步骤

1. 分别用含35S、32P的培养基培养大肠杆菌
2. 用上述大肠杆菌培养T2噬菌体，得到35S或32P标记的噬菌体
3. 让标记的噬菌体分别侵染未标记的大肠杆菌
4. 保温适当时间后，用搅拌器搅拌，使外壳与细菌分离
5. 离心，分为上清液和沉淀物两部分
6. 分别检测两部分的放射性，并检测子代噬菌体

实验现象与结论

35S标记组：放射性主要出现在上清液，沉淀物中很少，子代噬菌体中检测不到35S。32P标记组：放射性主要出现在沉淀物中，子代噬菌体中可检测到32P。结论：噬菌体侵染细菌时，进入细菌的是DNA，DNA是遗传物质。

注意事项

• 真实实验中的放射性同位素须在有资质的实验室按规范使用
• 噬菌体和细菌培养物用后须灭菌处理

常见问题

为什么不用14C或18O标记噬菌体？

C、O元素在蛋白质和DNA中都存在，无法区分两者的去向，而S主要在蛋白质中，P主要在DNA中。

搅拌的目的是什么？

使吸附在细菌表面的噬菌体外壳与细菌分离，便于离心后分别检测。