植物组织培养

实验目的

了解植物组织培养的过程，理解植物细胞全能性及激素的调控作用。

实验原理

植物细胞具有全能性。离体的外植体在适宜条件下经脱分化形成愈伤组织，再经再分化形成芽、根等器官，最终发育成完整植株。培养基中生长素和细胞分裂素的比例会影响分化方向：比值高利于生根，比值低利于生芽。

实验器材

• 植物外植体（如幼嫩的茎段或叶片）
• MS 固体培养基
• 生长素和细胞分裂素
• 消毒用酒精、次氯酸钠溶液
• 无菌水
• 超净工作台
• 镊子、解剖刀

实验步骤

1. 取外植体，用酒精和次氯酸钠溶液消毒，再用无菌水冲洗。
2. 在超净工作台上将外植体切成小块，接种到诱导培养基上。
3. 放在适宜温度下培养，外植体脱分化形成愈伤组织。
4. 将愈伤组织转入含不同激素比例的培养基，诱导生芽、生根。
5. 待长出完整小植株，经炼苗后移栽到土壤中。

实验现象与结论

外植体先长出无定形、排列疏松的愈伤组织，再转入分化培养基后依次长出芽和根，形成试管苗。通过调节激素比例，可以控制是先长芽还是先长根。试管苗经炼苗适应外界环境后可移栽成活。

注意事项

• 消毒试剂有刺激性，避免接触皮肤和眼睛。
• 使用解剖刀、镊子要小心，防止划伤。
• 严格无菌操作，防止培养物被污染。

常见问题

什么是脱分化和再分化？

脱分化是已分化的细胞恢复分裂能力形成愈伤组织；再分化是愈伤组织重新分化出芽、根等器官。

生长素和细胞分裂素的比例有什么作用？

二者比值高时有利于根的分化，比值低时有利于芽的分化，比例适中时促进愈伤组织形成。