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驱动蛋白与轴突运输

运动神经元的胞体在脊髓,轴突却可长达 1 米。胞体合成的蛋白、线粒体和突触囊泡,要靠驱动蛋白-1 沿着微管运往轴突末梢(顺向快速轴突运输)。本演示中驱动蛋白的两个马达头交替结合微管,拖着囊泡前进;可以调节 ATP 浓度和负载,观察速度和步频的变化。

医学大学运输:驱动蛋白三维互动
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驱动蛋白与轴突运输实验封面

实验目的

了解微管和驱动蛋白的结构,理解手拉手步进机制和轴突运输的意义。

实验原理

微管由 α/β 微管蛋白二聚体组成,外径约 25 nm,有 + 端和 − 端。驱动蛋白-1 向 + 端移动:前头结合 ATP 后颈链向前折叠,带动后头越过前头落在前方 16.4 nm 处,整个分子前进 8.2 nm(一个二聚体长度),每步水解 1 个 ATP。无负载时速度约 800 nm/s,速度与 ATP 浓度符合米氏动力学(Km 约 60 µM)。

实验器材

实验步骤

  1. 辨认微管的 α、β 微管蛋白和 + 端方向
  2. 观察两个马达头交替离开和结合微管
  3. 数步数,核对每步前进 8.2 nm、消耗 1 个 ATP
  4. 降低 ATP 浓度,观察两步之间停顿变长
  5. 查看「走完 1 米轴突需要几天」的换算

实验现象与结论

两个马达头交替前进,囊泡随之移动。生理 ATP 浓度下速度约 700~800 nm/s,走完 1 米长的坐骨神经轴突约需 15~16 天;ATP 浓度降低时步频下降,速度变慢。

注意事项

常见问题

驱动蛋白每一步走多远?
每步 8.2 nm,正好是一个 α/β 微管蛋白二聚体的长度,每步消耗 1 个 ATP。
驱动蛋白朝哪个方向运输?
驱动蛋白-1 向微管 + 端移动,在轴突中就是从胞体运往末梢;向胞体方向的运输主要靠动力蛋白。

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