观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂
根尖分生区的细胞分裂旺盛,是观察植物细胞有丝分裂的常用材料。实验按解离、漂洗、染色、制片的顺序制成临时装片,再用显微镜从低倍到高倍观察,识别各时期细胞的特点,并比较各时期细胞数目的多少。
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实验目的
学会制作植物根尖临时装片,识别有丝分裂各时期细胞,理解分裂间期时间最长。
实验原理
分生区细胞排列紧密、呈正方形,分裂活跃。盐酸和酒精的混合液使细胞相互分离,染色体容易被甲紫溶液或醋酸洋红液等碱性染料染成深色。通过染色体的形态和位置,可以判断细胞所处的分裂时期。
实验器材
- 洋葱根尖(水培3~4天,根长约5 cm)
- 质量分数15%的盐酸
- 体积分数95%的酒精
- 甲紫溶液(或醋酸洋红液)
- 清水
- 显微镜
- 载玻片和盖玻片
- 镊子、剪刀
- 培养皿或小烧杯
- 滤纸
实验步骤
- 剪取洋葱根尖2~3 mm。
- 解离:放入盐酸与酒精体积比1∶1的混合液中3~5 min。
- 漂洗:用清水漂洗约10 min,洗去药液。
- 染色:放入甲紫溶液中染色3~5 min。
- 制片:根尖置于载玻片,加清水,盖上盖玻片,用拇指轻压使细胞分散。
- 先用低倍镜找到分生区(细胞呈正方形、排列紧密)。
- 换高倍镜观察各时期细胞,并统计数目、绘图。
实验现象与结论
分生区细胞多为正方形,排列紧密。视野中可以看到处于间期、前期、中期、后期和末期的细胞,其中处于间期的细胞数目最多,说明间期在细胞周期中占的时间最长。解离时细胞已被杀死,看到的只是不同时期的静态图像,不能看到某个细胞的连续分裂过程。
注意事项
- 盐酸有腐蚀性,使用时戴手套和护目镜。
- 染色剂易染色,避免沾到衣物和皮肤。
- 压片时用力要轻,防止盖玻片破碎。
常见问题
- 为什么看不到细胞连续分裂的过程?
- 解离后细胞已经死亡,只能看到固定在不同时期的细胞,需要靠多个细胞推断过程。
- 为什么要先漂洗再染色?
- 洗去盐酸,防止盐酸影响染色效果,使染色体着色清晰。
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