提取叶绿素
叶绿体中的光合色素溶于有机溶剂,可以用无水乙醇提取。本实验通过研磨、过滤得到色素提取液,了解研磨时加入二氧化硅和碳酸钙的作用,也可进一步用纸层析法观察叶绿素和类胡萝卜素的分离。
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实验目的
学会用无水乙醇提取绿叶中的色素,了解提取过程中各试剂的作用。
实验原理
绿叶中的叶绿素和类胡萝卜素等色素能溶解在无水乙醇等有机溶剂中,所以可用无水乙醇提取。加入二氧化硅有助于研磨充分,加入碳酸钙可防止研磨中色素被破坏。纸层析时,溶解度大的色素随层析液扩散快。
实验器材
- 新鲜菠菜叶
- 无水乙醇
- 二氧化硅
- 碳酸钙
- 研钵和研杵
- 漏斗和单层尼龙布
- 试管和棉塞
- 滤纸条和层析液(分离用)
实验步骤
- 称取新鲜菠菜叶,去掉粗大叶脉并剪碎,放入研钵
- 加入少许二氧化硅和碳酸钙,再加入10 mL无水乙醇
- 迅速、充分研磨成匀浆
- 将匀浆倒入垫有单层尼龙布的漏斗过滤,收集滤液
- 用棉塞塞紧试管口,防止乙醇挥发
- (选做)在滤纸条上画滤液细线,用层析液分离色素
实验现象与结论
滤液呈绿色,说明叶绿素已被提取。若做纸层析,滤纸条上自上而下依次出现胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)四条色素带。
注意事项
- 无水乙醇易燃,远离明火
- 层析液易挥发且有毒,在通风处操作
- 研磨要迅速,并及时盖好试管口
常见问题
- 研磨时为什么要加碳酸钙?
- 碳酸钙可中和细胞中的酸性物质,防止研磨时叶绿素被破坏。
- 为什么用无水乙醇而不用水提取色素?
- 光合色素不溶于水,而溶于无水乙醇等有机溶剂。
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