血球计数板计数酵母菌

实验目的

学会用血球计数板计数,估算培养液中酵母菌的种群密度。

实验原理

常用计数板的计数室边长1 mm、深0.1 mm,体积0.1 mm³,即10⁻⁴ mL。以25×16规格为例,大方格含25个中方格。每毫升细胞数 =(每个中方格平均数 × 25)÷ 10⁻⁴ × 稀释倍数。

实验器材

• 酵母菌培养液
• 血球计数板
• 盖玻片
• 滴管
• 试管
• 显微镜
• 吸水纸

实验步骤

1. 取样前轻轻振荡试管,使酵母菌分布均匀
2. 将盖玻片盖在计数室上
3. 用滴管把培养液滴在盖玻片边缘,让其自行渗入
4. 用吸水纸吸去多余培养液,静置片刻使细胞沉降
5. 低倍镜下找到计数室,再换高倍镜计数
6. 数几个中方格内的细胞数,求平均值并计算种群密度

实验现象与结论

高倍镜下可见计数室方格和椭圆形的酵母菌,有的细胞带有芽体。计数时压在方格线上的细胞,通常只计相邻两边及其夹角上的。培养液浓度过大时需先稀释,再按稀释倍数换算。

注意事项

• 先盖盖玻片再滴培养液,避免产生气泡
• 计数板用后及时冲洗,避免用硬物擦拭
• 取样和计数时间要一致,便于比较

常见问题

为什么取样前要振荡试管?

酵母菌容易沉降,不振荡会使取样不均匀,计数结果偏大或偏小。

酵母菌太多数不过来怎么办?

可先将培养液按一定倍数稀释,计数后再乘以稀释倍数换算。