淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用
本实验取两支试管,分别盛淀粉溶液和蔗糖溶液,加入等量淀粉酶溶液,保温后用斐林试剂检验。通过比较两支试管的颜色变化,可以判断淀粉酶是否能水解这两种底物,从而说明酶作用的专一性。
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实验目的
探究淀粉酶对不同底物的作用,说明酶具有专一性。
实验原理
淀粉在淀粉酶作用下水解为麦芽糖等还原糖:淀粉 + 水 =淀粉酶= 麦芽糖。蔗糖不是还原糖,淀粉酶不能催化其水解。斐林试剂与还原糖在水浴加热时生成砖红色沉淀,可据此判断底物是否被水解。
实验器材
- 淀粉溶液
- 蔗糖溶液
- 淀粉酶溶液
- 斐林试剂(现配现用)
- 试管和试管架
- 60 ℃左右热水
- 烧杯、酒精灯
- 滴管
实验步骤
- 取2支试管编号,分别加入2 mL淀粉溶液和蔗糖溶液。
- 各加入等量淀粉酶溶液,振荡后在60 ℃左右保温数分钟。
- 向两支试管各加入等量斐林试剂。
- 将试管放入50~65 ℃水浴中加热约2分钟。
- 观察并比较两支试管的颜色变化。
实验现象与结论
加淀粉的试管出现砖红色沉淀,说明淀粉被水解成了还原糖;加蔗糖的试管没有砖红色沉淀,仍呈斐林试剂的蓝色。说明淀粉酶只能催化淀粉水解,不能催化蔗糖水解,酶具有专一性。
注意事项
- 斐林试剂含氢氧化钠和硫酸铜,避免入眼和接触皮肤。
- 水浴加热时试管口不要对着人。
- 酒精灯用后用灯帽盖灭。
常见问题
- 为什么用斐林试剂而不用碘液?
- 碘液只能检测淀粉,无法检测蔗糖是否被水解;斐林试剂检测水解产生的还原糖,两组都适用。
- 蔗糖组为什么没有砖红色沉淀?
- 蔗糖不是还原糖,淀粉酶又不能使它水解,所以不会出现砖红色沉淀。
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