实验目的
体验用红细胞制备细胞膜的方法,理解选择实验材料的依据。
实验原理
哺乳动物成熟红细胞没有细胞核和众多细胞器,膜的种类单一。把红细胞放入蒸馏水中,细胞内液浓度大于外界,细胞吸水膨胀直至破裂,内容物流出,再经离心分离,可得到较纯净的细胞膜。
实验器材
- 哺乳动物新鲜血液(如猪、羊血)
- 生理盐水
- 蒸馏水
- 显微镜
- 载玻片和盖玻片
- 吸水纸
- 滴管
- 离心机和离心管
实验步骤
- 用生理盐水稀释新鲜血液,制成红细胞稀释液
- 取一滴稀释液制成临时装片,在低倍镜下观察红细胞的形态
- 在盖玻片一侧滴蒸馏水,另一侧用吸水纸吸引
- 持续观察红细胞的变化,直到细胞破裂
- 将红细胞放入蒸馏水涨破,离心后取沉淀物,即为细胞膜
实验现象与结论
滴加蒸馏水后,红细胞逐渐膨大,最后破裂,内容物流出。离心后得到的沉淀物主要是细胞膜。结论:用哺乳动物成熟红细胞吸水涨破的方法,可以获得较纯净的细胞膜。
注意事项
- 血液材料应来自正规渠道并保持新鲜
- 实验结束后清洗器具并洗手
- 离心机使用前确认离心管配平
常见问题
- 为什么选哺乳动物成熟红细胞而不用鸡的红细胞?
- 哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器,而鸡的红细胞有细胞核,膜的种类多,不易得到单纯细胞膜。
- 红细胞为什么会在蒸馏水中破裂?
- 蒸馏水浓度低于细胞内液,红细胞通过渗透作用吸水膨胀,最终涨破。
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