酵母菌的纯培养

实验目的

体验酵母菌的纯培养过程，学会分离并观察酵母菌的菌落。

实验原理

纯培养的关键是防止杂菌污染并使样品中的微生物分散成单个细胞。用适合酵母菌生长的固体培养基，通过平板划线法或稀释涂布平板法接种，单个酵母菌繁殖形成肉眼可见的菌落，挑取单菌落即可得到纯培养物。

实验器材

• 适合酵母菌生长的固体培养基
• 含酵母菌的样品（如酵母菌液）
• 培养皿
• 接种环或涂布器
• 酒精灯
• 恒温培养箱
• 显微镜（观察细胞形态）

实验步骤

1. 配制培养基，经高压蒸汽灭菌后倒平板。
2. 取酵母菌样品，需要时先做梯度稀释。
3. 用平板划线法或稀释涂布平板法接种到平板。
4. 将平板倒置，放入恒温培养箱（约 28 ℃）中培养。
5. 观察菌落的形状、大小、颜色和表面特征。
6. 挑取单菌落制片，在显微镜下观察酵母菌细胞。

实验现象与结论

培养一段时间后，平板上出现圆形、表面较光滑湿润、颜色多为乳白色的单菌落。显微镜下可见酵母菌细胞呈圆形或椭圆形，有的细胞上带有芽体。若平板上出现颜色、形态差异明显的菌落，则说明可能有杂菌污染。

注意事项

• 全程无菌操作，接种环、涂布器须灭菌。
• 使用酒精灯时注意安全，远离易燃物。
• 培养物不得入口，实验后洗手并灭菌处理。

常见问题

什么是纯培养？

纯培养是指获得只含一种微生物的培养物，通常通过挑取单菌落再培养实现。

怎样判断培养物中是否混有杂菌？

观察菌落的形状、大小、颜色等是否一致，必要时用显微镜检查细胞形态。