分解纤维素的微生物的分离

实验目的

学会从土壤中分离纤维素分解菌，理解选择培养基与鉴别培养基的作用。

实验原理

纤维素酶可将纤维素分解为纤维二糖和葡萄糖。刚果红能与纤维素形成红色复合物，但不与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。纤维素被分解后，菌落周围红色复合物消失，出现透明圈，据此可筛选纤维素分解菌。

实验器材

• 富含纤维素的土样
• 以纤维素为唯一碳源的选择培养基
• 鉴别用刚果红培养基
• 无菌水和试管
• 涂布器
• 锥形瓶
• 恒温培养箱

实验步骤

1. 在富含纤维素的环境中取土样，如腐烂的树叶、朽木附近。
2. 将土样加入选择培养基中振荡培养，使目的菌增殖。
3. 取培养液做梯度稀释。
4. 将适宜稀释度的菌液涂布到含刚果红的固体培养基上。
5. 倒置培养，观察菌落周围是否出现透明圈。
6. 挑取产生透明圈的菌落，进一步纯化。

实验现象与结论

培养基因刚果红与纤维素结合而呈红色。纤维素分解菌的菌落周围，纤维素被分解，形成透明圈。一般透明圈越大、越明显，说明该菌分解纤维素的能力可能越强，可作为进一步筛选的依据。

注意事项

• 取样和接种时注意个人卫生，实验后洗手。
• 不得品尝或接触培养物，操作后按规定灭菌。
• 使用酒精灯、涂布器时注意防火。

常见问题

为什么要用以纤维素为唯一碳源的培养基？

只有能利用纤维素的微生物才能生长繁殖，其他微生物受抑制，从而起到选择作用。

透明圈是怎么形成的？

刚果红与纤维素形成红色复合物，纤维素被酶分解后复合物消失，菌落周围就出现透明圈。