观察DNA和RNA在细胞中的分布
本实验是高中生物必修1“细胞中的核酸”相关的经典实验。用甲基绿吡罗红混合染色剂给口腔上皮细胞染色,在显微镜下可以看到细胞核和细胞质呈现不同颜色,由此了解两类核酸在真核细胞中的主要分布位置。
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实验目的
观察DNA和RNA在真核细胞中的分布,学会使用甲基绿吡罗红染色剂。
实验原理
甲基绿和吡罗红对DNA、RNA的亲和力不同:甲基绿使DNA呈绿色,吡罗红使RNA呈红色。盐酸可改变细胞膜的通透性,并使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于染色剂进入细胞并与DNA结合。
实验器材
- 人的口腔上皮细胞(或洋葱鳞片叶内表皮)
- 0.9%NaCl溶液
- 8%盐酸
- 蒸馏水
- 甲基绿吡罗红染色剂
- 显微镜
- 载玻片和盖玻片
- 烧杯及水浴装置
- 消毒牙签
实验步骤
- 制片:载玻片上滴0.9%NaCl溶液,用消毒牙签刮取口腔内侧壁细胞并涂抹,烘干。
- 水解:将载玻片放入8%盐酸中,30℃水浴约5min。
- 冲洗:取出后用蒸馏水缓水流冲洗约10s,吸去多余水分。
- 染色:滴加甲基绿吡罗红染色剂染色约5min,吸去多余染液,盖上盖玻片。
- 观察:先用低倍镜找到染色均匀、细胞分散的区域,再换高倍镜观察。
实验现象与结论
高倍镜下可见细胞核被染成绿色,细胞质被染成红色。说明DNA主要分布在细胞核中,RNA主要分布在细胞质中。线粒体、叶绿体中也含少量DNA,但此实验中不易观察到。
注意事项
- 盐酸有腐蚀性,避免接触皮肤和衣物
- 牙签须消毒,用后丢弃
- 冲洗时水流要缓,防止冲掉细胞
- 水浴温度和时间要控制好
常见问题
- 实验中为什么要用8%的盐酸处理细胞?
- 盐酸能改变细胞膜通透性,加速染色剂进入细胞,还能使染色质中DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂结合。
- 为什么一般不选绿色的叶肉细胞做材料?
- 叶肉细胞本身含绿色色素,会干扰对甲基绿、吡罗红染色结果的观察,应选无色或浅色的细胞。
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