检测生物组织中的蛋白质

实验目的

学会用双缩脲试剂检测生物组织中的蛋白质。

实验原理

在碱性条件下，蛋白质中的肽键能与Cu2+结合生成紫色络合物。因此，双缩脲试剂可用来鉴定蛋白质。双缩脲试剂A液是0.1 g/mL NaOH溶液，B液是0.01 g/mL CuSO4溶液，使用时先加A液，再加B液。

实验器材

• 豆浆或鸡蛋清稀释液
• 双缩脲试剂A液（0.1 g/mL NaOH）
• 双缩脲试剂B液（0.01 g/mL CuSO4）
• 试管
• 滴管
• 量筒或移液管
• 清水（对照）

实验步骤

1. 取2支试管，分别加入2 mL样液和2 mL清水作对照。
2. 向各试管中加入双缩脲试剂A液1 mL，摇匀。
3. 再向各试管中滴加B液4滴，摇匀。
4. 静置片刻，观察并比较两支试管的颜色变化。

实验现象与结论

盛有豆浆或鸡蛋清稀释液的试管出现紫色，清水对照管无紫色（呈B液的淡蓝色）。说明样液中含有蛋白质。

注意事项

• NaOH溶液有腐蚀性，避免接触皮肤和眼睛。
• B液不可过量，否则蓝色会掩盖紫色。
• 鸡蛋清要充分稀释，以免黏附在试管壁上。
• 实验后试剂按要求回收处理。

常见问题

为什么要先加A液再加B液？

先加A液提供碱性环境，再加少量B液提供Cu2+，才能生成紫色络合物；B液过量会掩盖颜色。

检测蛋白质时需要加热吗？

不需要，双缩脲反应在常温下即可发生，与斐林试剂检测还原糖不同。